Hur gör man ammoniumsulfatfällning?
Hur gör man ammoniumsulfatfällning?

Video: Hur gör man ammoniumsulfatfällning?

Video: Hur gör man ammoniumsulfatfällning?
Video: Hur gör man ost 2024, November
Anonim

Tillsätt fast ammoniumsulfat långsamt under försiktig omrörning; låt lösas upp innan du lägger till mer fast, försök att förhindra skumbildning. Miniräknare online burk tillgänglig för att bekvämt bestämma mängderna fast material ammoniumsulfat krävs för att nå en given mättnad.

Utöver detta, hur fungerar ammoniumsulfatutfällning?

Mekanism. Ammoniumsulfat såväl som andra neutrala salter, kommer stabilisera proteiner genom preferentiell solvatisering. Proteiner är vanligtvis förvaras i ammoniumsulfat eftersom det hämmar bakterietillväxt. Vid en tillräckligt hög jonstyrka, proteinet kommer att fällas ut ut ur lösningen, en effekt som kallas "utsaltning".

Likaså, hur löser man ammoniumsulfat? Förbered mättad lösning av Ammoniumsulfat , till exempel ~550g fyllt på 1L destillerat vatten. Värm försiktigt till upplösa alla Ammoniumsulfat och låt svalna till arbetstemperatur på en magnetomrörare. Kristaller av ammoniumsulfat bör bildas och kommer att berätta att lösningen är helt mättad.

Bara så, hur gör man 100 ammoniumsulfatlösning?

Till göra 100 % mättad ammoniumsulfat vid 25oC: Till 1000 ml dH2O tillsätt 766,8 g (NH4)24. pH till 6,8-7,0 med 5 eller 10 M NaOH. Så det finns 541,2 g av ammoniumsulfat per 1 mättad lösning.

Denaturerar ammoniumsulfat proteiner?

Eftersom ammoniumsulfat utfällning minskar endast lösligheten av proteiner och gör inte denaturera dem proteiner kan koncentreras genom att ta bort resten ammoniumsulfat lösning sedan protein pellet kan återsolubiliseras i standardbuffertar eller en lägre koncentration av ammoniumsulfat.

Rekommenderad: